摘 要： 蛋白質吸附、鈣磷離子釋放和表面生物礦化是鈣磷材料誘導異位骨生成的可能材料機制。對比了非表 面微孔羥基磷灰石陶瓷（ＨＡ－Ｓ）、表面微孔羥基磷灰石陶瓷（ＨＡ－Ｒ）和表面微孔生物惰性非鈣磷陶瓷（ＴｉＯ２ 陶瓷； 氧化鋁陶瓷；兩(liang)者(zhe)無鈣磷釋放，無表面生(sheng)物礦化(hua)(hua)能力）的異位骨誘(you)(you)導(dao)能力。研(yan)究(jiu)發現，不(bu)同化(hua)(hua)學成分的陶(tao)瓷材料對 蛋(dan)白質有選擇性吸附。即使(shi)不(bu)吸附骨形態發生(sheng)蛋(dan)白－２（ｒｈＢＭＰ－２），具有表面微(wei)(wei)孔的非鈣磷陶(tao)瓷也(ye)能誘(you)(you)導(dao)異位骨 組織生(sheng)成。結(jie)果表明，鈣磷離子(zi)釋放和表面生(sheng)物礦化(hua)(hua)在(zai)磷酸鈣生(sheng)物材料骨誘(you)(you)導(dao)中不(bu)起關(guan)鍵作(zuo)(zuo)用，表面微(wei)(wei)孔也(ye)不(bu)一 定(ding)通過蛋(dan)白質吸附而在(zai)異位骨誘(you)(you)導(dao)中起作(zuo)(zuo)用。
０ 引 言
發生(sheng)(sheng)在(zai)非骨部位的(de)骨再生(sheng)(sheng)生(sheng)(sheng)物學過(guo)程叫骨誘(you)(you)導， 骨誘(you)(you)導較(jiao)的(de)例子是(shi)(shi)含有骨形態發生(sheng)(sheng)蛋白（ＢＭＰ） 的(de)種植體(ti)在(zai)軟組織(zhi)中的(de)骨組織(zhi)生(sheng)(sheng)成(cheng)。在(zai)不加生(sheng)(sheng)長(chang) 因(yin)子的(de)情況(kuang)下，具(ju)(ju)有特(te)殊(shu)物理化學特(te)性的(de)磷(lin)酸鈣陶(tao)瓷 也具(ju)(ju)有骨誘(you)(you)導能力。其(qi)中，材(cai)料表面(mian)微孔(kong)性扮演重 要角色。具(ju)(ju)有表面(mian)微孔(kong)的(de)羥基磷(lin)灰(hui)石(shi)陶(tao)瓷在(zai)肌肉種植 后(hou)能夠誘(you)(you)導骨組織(zhi)生(sheng)(sheng)成(cheng)，但(dan)是(shi)(shi)沒(mei)有表面(mian)微孔(kong)的(de)羥基磷(lin) 灰(hui)石(shi)陶(tao)瓷沒(mei)有骨誘(you)(you)導能力。
由于磷(lin)(lin)酸鈣(gai)材料對(dui)骨(gu)形態(tai)發生蛋白(bai)（ＢＭＰ）有(you)較 強的吸附(fu)能(neng)力(li)，具有(you)表面(mian)微孔的磷(lin)(lin)酸鈣(gai)陶瓷的骨(gu)誘(you)導(dao) 作用(yong)通常(chang)被解釋為微孔擴大了(le)磷(lin)(lin)酸鈣(gai)陶瓷的表面(mian)積(ji)， 從(cong)而可(ke)以從(cong)體(ti)液中吸附(fu)更多的蛋白(bai)質(zhi)(zhi)（包括骨(gu)誘(you)導(dao)因(yin) 子如(ru)ＢＭＰ），而這些被吸附(fu)在(zai)鈣(gai)磷(lin)(lin)陶瓷表面(mian)的蛋白(bai)質(zhi)(zhi) 骨(gu)誘(you)導(dao)因(yin)子較終誘(you)發了(le)骨(gu)組織形成。
另外(wai)近年來發(fa)現鈣(gai)(gai)，磷(lin)(lin)離(li)子(zi)(zi)對多潛能(neng)干(gan)細胞的(de)(de)骨(gu) 相分化有促(cu)進作用(yong)。磷(lin)(lin)酸鈣(gai)(gai)陶瓷表面微(wei)孔在骨(gu)誘(you)(you) 導中(zhong)的(de)(de)作用(yong)也(ye)被(bei)解釋為(wei)微(wei)孔增加磷(lin)(lin)酸鈣(gai)(gai)陶瓷的(de)(de)表面 積(ji)，從而(er)有利于鈣(gai)(gai)磷(lin)(lin)離(li)子(zi)(zi)的(de)(de)釋放，釋放的(de)(de)鈣(gai)(gai)磷(lin)(lin)離(li)子(zi)(zi)可能(neng) 引(yin)發(fa)骨(gu)誘(you)(you)導。
磷(lin)(lin)酸鈣(gai)(gai)材料是(shi)典型(xing)的(de)生物活性材料。在(zai)(zai)體液中磷(lin)(lin) 酸鈣(gai)(gai)陶瓷材料能(neng)在(zai)(zai)其表面形(xing)成(cheng)類骨(gu)磷(lin)(lin)灰(hui)石(shi)(shi)層(ceng)。磷(lin)(lin) 灰(hui)石(shi)(shi)層(ceng)的(de)形(xing)成(cheng)以(yi)及在(zai)(zai)磷(lin)(lin)灰(hui)石(shi)(shi)層(ceng)形(xing)成(cheng)過程中參(can)與進來的(de)蛋白質（包括生長因(yin)子）也(ye)被認為是(shi)磷(lin)(lin)酸鈣(gai)(gai)陶瓷骨(gu)誘導 的(de)可能(neng)原因(yin)。
本文考察(cha)了不具備表(biao)面(mian)微(wei)孔的(de)羥(qian)基磷灰(hui)石(shi)陶(tao)瓷(ci) （ＨＡ－Ｓ），具備表(biao)面(mian)微(wei)孔的(de)羥(qian)基磷灰(hui)石(shi)陶(tao)瓷(ci)（ＨＡ－Ｒ）， 具備表(biao)面(mian)微(wei)孔的(de)ＴｉＯ２ 陶(tao)瓷(ci)和(he)氧化(hua)(hua)鋁 陶(tao)瓷(ci)的(de)蛋(dan)白(bai)吸(xi)附(fu)(fu) 能力，并比較(jiao)這些陶(tao)瓷(ci)材料的(de)異(yi)位(wei)(wei)成(cheng)骨能力。以期(qi)論 證(zheng)蛋(dan)白(bai)質吸(xi)附(fu)(fu)，鈣(gai)磷離子釋(shi)放和(he)表(biao)面(mian)生(sheng)物礦化(hua)(hua)在生(sheng)物 材料異(yi)位(wei)(wei)骨誘導中的(de)可能作用。
１ 實 驗
１．１ 材料制備
陶(tao)瓷(ci)材料用雙氧(yang)(yang)水發泡(pao)，并(bing)在(zai)(zai)高溫(wen)下燒結(jie)制備。 具體(ti)來說，羥基磷灰石粉(fen)末（Ｍｅｒｃｋ，Ｇｅｒｍａｎｙ），二(er)氧(yang)(yang)化 鈦粉(fen)末（Ｆｌｕｋａ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）以及三氧(yang)(yang)化二(er)鋁粉(fen)末 （Ｆｌｕｋａ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ），分(fen)(fen)別用稀釋的(de)(de)雙氧(yang)(yang)水溶(rong)液（２％ （質量(liang)分(fen)(fen)數(shu)））混合均勻，然后(hou)在(zai)(zai)６０℃進(jin)行發泡(pao)和干(gan)燥(zao)， 制備成陶(tao)瓷(ci)坯體(ti)。ＨＡ胚體(ti)在(zai)(zai)１ ２５０℃燒結(jie)８ｈ得到 非微(wei)孔(kong)的(de)(de)的(de)(de)羥基磷灰石陶(tao)瓷(ci)（ＨＡ－Ｓ），在(zai)(zai)１１００℃燒結(jie) ８ｈ得到微(wei)孔(kong)的(de)(de)羥基磷灰石陶(tao)瓷(ci)（ＨＡ－Ｒ）。ＴｉＯ２ 陶(tao)瓷(ci) 在(zai)(zai)１２００℃燒結(jie)２００ｍｉｎ，氧(yang)(yang)化鋁 陶(tao)瓷(ci)在(zai)(zai)１３００℃燒結(jie) １０ｈ。燒結(jie)后(hou)的(de)(de)陶(tao)瓷(ci)塊加工成直徑為５ｍｍ，長度為 ６ｍｍ的(de)(de)柱狀樣品，然后(hou)分(fen)(fen)別用丙(bing)酮，７０％（質量(liang)分(fen)(fen)數(shu)） 乙醇和去離子水很聲清洗(xi)，干(gan)燥(zao)后(hou)在(zai)(zai)１２１ ℃下滅菌 ３０ｍｉｎ。
１．２ 材料表征
用Ｘ射線(xian)衍射儀（Ｘ’Ｐｅｒｔｐｒｏ－ＭＰＤ，ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ） 分(fen)析陶瓷(ci)材(cai)料(liao)的(de)(de)化學成分(fen)；對材(cai)料(liao)的(de)(de)表面(mian)結(jie)構 進行掃(sao)描電鏡（ＨＩＴＡＣＨＩ Ｓ４８００，Ｊａｐａｎ）觀察；用ＢＥＴ （ＴｒｉｓｔａｒⅡ３０２０，Ａｍｅｒｉｃａ）方(fang)法檢測(ce)陶瓷(ci)材(cai)料(liao)的(de)(de)表面(mian) 積。
１．３ 牛血清蛋(dan)白（ＢＳＡ）和溶(rong)菌酶素（ｌｙｓｏｚｙｍｅ）的(de)吸(xi) 附
將陶瓷樣(yang)品(pin)（ｎ＝３）分(fen)別浸泡在３ｍＬ含有２５× １０－６疊(die)氮化鈉（ＮａＮ３）和２００μｇ／ｍＬ牛血清(qing)蛋(dan)(dan)白(bai)（Ｆｌｕｋａ， Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）或(huo)者２０μｇ／ｍＬ 溶(rong)菌酶素（Ｆｌｕｋａ， Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）或(huo)者１％（質量分(fen)數）胎牛血清(qing)（ＦＢＳ， ＧｉｂｃｏＴＭ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，ＵＫ）溶(rong)液(ye)中，并在 ３７℃水(shui)浴中震蕩。７ｄ后，將樣(yang)品(pin)離心（３ ０００ｒ／ｍｉｎ） ５ｍｉｎ，取上清(qing)液(ye)作蛋(dan)(dan)白(bai)分(fen)析(xi)。用ＢＣＡ 蛋(dan)(dan)白(bai)濃(nong)度檢測 法（Ｍｉｃｒｏ ＢＣＡＴＭｐｒｏｔｅｉｎ ａｓｓａｙ ｋｉｔ，ｐｉｅｒｃｅ ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ，ＵＳＡ）檢測蛋(dan)(dan)白(bai)質，并用相應蛋(dan)(dan)白(bai) 的標(biao)準(zhun)曲(qu)線計算(suan)蛋(dan)(dan)白(bai)濃(nong)度。
１．４ ｒｈＢＭＰ－２的吸(xi)附 將４種陶瓷(ci)樣(yang)(yang)(yang)品（ｎ＝３）浸泡在(zai)３ｍＬ含(han)有５００ｎｇ ｒｈＢＭＰ－２／ｍＬ（Ｈｕａｄｏｎｇ Ｅａｓｔ－Ｃｈｉｎａ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｇｒｏｕｐ ｉｎｖｅｓｔｍｅｎｔ Ｃｏ．Ｌｔｄ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ，Ｃｈｉｎａ）的細(xi)胞(bao) 培養(yang)(yang)液中。細(xi)胞(bao)培養(yang)(yang)液由(you)ＤＭＥＭ（ＧｉｂｃｏＴＭ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，ＵＫ），１０％ 胎牛(niu)血清（ＦＢＳ）（ＧｉｂｃｏＴＭ， Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，ＵＫ），１００μｇ／ｍＬ盤尼西林和１００μｇ／ｍＬ鏈霉素組成。樣(yang)(yang)(yang)品在(zai)３７ ℃，５％ ＣＯ２ 培養(yang)(yang)箱中孵(fu)化２４ｈ后(hou)，用磷酸鹽緩沖(chong)液（ｐＨ 值＝ ７．４）潤洗３次，并保存在(zai)－８０℃。１２ｈ后(hou)每個(ge)樣(yang)(yang)(yang)品添 加０．５ｍＬ １％ Ｔｒｉｔｏｎ并在(zai)４℃冰箱保存。１２ｈ后(hou)，樣(yang)(yang)(yang) 品在(zai)很聲波(bo)水浴中處(chu)理５ｍｉｎ。離心(xin)（Ｘ３ ０００ｒ／ｍｉｎ） ５ｍｉｎ，依(yi)照(zhao)ｒｈＢＭＰ－２酶(mei)聯(lian)免疫反應測(ce)定法（ｒｈＢＭＰ－２ Ｅｌｉｓａ，Ｒ＆Ｄ，ＵＫ）測(ce)定上清液中的ｒｈＢＭＰ－２蛋白濃 度。
１．５ 動物實驗
６條成(cheng)熟雄性(xing)狗（體重為１０～１５ｋｇ）在本地購買。 麻醉(zui)（戊(wu)巴(ba)比(bi)妥鈉（３０ｍｇ／ｋｇ）），消毒（酒精(jing)，碘伏(fu)）后， 在狗背(bei)部(bu)用手術刀劃開一(yi)個縱向皮膚切口(kou)并暴露(lu)肌(ji) 肉，再鈍性(xing)分開肌(ji)肉成(cheng)袋狀，將樣(yang)品植(zhi)入(ru)肌(ji)肉袋中(zhong)。
４個單獨(du)的肌(ji)肉袋間隔２ｃｍ 左(zuo)右，每個肌(ji)肉袋中種植 一個樣(yang)(yang)品。手(shou)術后(hou)，肌(ji)肉連續注(zhu)射(she)青霉(mei)素３ｄ，防(fang)止感 染。１２周后(hou)，用過量(liang)的戊(wu)巴(ba)比妥鈉處死動(dong)物，取(qu)出樣(yang)(yang) 品并固定在４％的福爾馬林溶液中（ｐＨ 值(zhi)＝７．４）。 １周后(hou)，取(qu)出樣(yang)(yang)品，用ＰＢＳ沖洗，梯度酒精（７０％，８５％， ９０％，９５％，１００％×２）脫(tuo)水，ＭＭＡ包(bao)埋。硬組(zu)織切(qie)片 機（Ｌｅｉｃａ ＳＰ－１６００，Ｇｅｒｍａｎｙ）切(qie)片（１０～２０μｍ）。亞 甲基藍(lan)和(he)品紅染色后(hou)，作定性和(he)定量(liang)的組(zu)織學觀察。
為了(le)組織形態學分析，切(qie)片首先用(yong)掃描(miao)儀（Ｄｉｍａｇｅ Ｓｃａｎ Ｅｌｉｔｅ ５４００ＩＩ，Ｊａｐａｎ）掃描(miao)，然后用(yong)ＰｈｏｔｏｓｈｏｐＣＳ５ 處理圖(tu)片，讀出(chu)選(xuan)中區域、材料(liao)、骨頭(tou)三者的像素值(zhi)，根(gen) 據公式
計算(suan)陶瓷材料(liao)大(da)孔中的成骨(gu)量和材料(liao)在樣品中的 百分比。用光學顯微鏡（Ｎｉｋｏｎ Ｅｃｌｉｐｓｅ Ｅ２００，Ｔｏｋｙｏ， Ｊａｐａｎ）觀(guan)察樣品中的組織(zhi)成分（血管(guan)，新生(sheng)骨(gu)組織(zhi)和成 骨(gu)細胞(bao)）。
１．６ 統計學分析
數據均采用平均值加減標(biao)準方差(cha)的形式表達。用 量(liang)化Ｔｕｒｋｅｙ對(dui)比對(dui)數據進(jin)行單因素方差(cha)統(tong)計分析，ｐ ＜０．０５被認定為顯著性差(cha)異。
２ 結果與討論
２．１ 材料表征
材料(liao)的(de)ＸＲＤ圖(tu)譜如圖(tu)１所(suo)示。由圖(tu)１可知，ＨＡＳ 和ＨＡ－Ｒ在不同溫度燒結（ＨＡ－Ｓ，１２５０℃；ＨＡ－Ｒ， １１００℃），但它(ta)們(men)的(de)特征(zheng)峰與標準(zhun)羥基磷灰石一(yi)致(zhi)。 ＴｉＯ２ 在２θ＝２７．６，３６．２８，４１．４，５４．５，５６．７８和６９．１６°有 明顯的(de)特征(zheng)衍(yan)射峰，與ｒ－ＴｉＯ２ 的(de)ＸＲＤ 標準(zhun)峰一(yi)致(zhi)。
氧(yang)化(hua)鋁(lv) 在２θ＝２５．７，３５．３，３７．９，４３．４８，５２．６８，５７．６２， ６６．６２和６８．３２°處有明顯(xian)的特征衍(yan)射峰，與α－氧(yang)化(hua)鋁(lv) 的 ＸＲＤ標(biao)準峰一致。
從圖(tu)１可(ke)知，１ ２５０℃燒結后，ＨＡ晶體熔融在(zai)一起，導致ＨＡ－Ｓ形成較光滑(hua)的(de)表(biao)(biao)面（圖(tu)２（ａ）），但是 １ １００℃燒結的(de)ＨＡ－Ｒ表(biao)(biao)面有(you)豐(feng)富的(de)微(wei)孔（圖(tu)２（ｂ））。 ＴｉＯ２ 表(biao)(biao)面同樣可(ke)以(yi)看到豐(feng)富的(de)微(wei)孔（圖(tu)２（ｃ））。在(zai) １ ３００℃下，很少氧(yang)化鋁 晶體（細微(wei)顆(ke)粒(li)）熔融，顆(ke)粒(li)堆 疊在(zai)一起形成微(wei)孔（圖(tu)２（ｄ））。ＢＥＴ 無法檢(jian)測ＨＡ－Ｓ 表(biao)(biao)面積(ji)，ＨＡ－Ｒ的(de)表(biao)(biao)面面積(ji)為(wei)(wei)０．７７７ｍ２／ｍＬ，ＴｉＯ２ 的(de) 表(biao)(biao)面面積(ji)為(wei)(wei)０．１０２ｍ２／ｍＬ，氧(yang)化鋁 為(wei)(wei)０．２０６ｍ２／ｍＬ（表(biao)(biao) １）。４種不(bu)同的(de)微(wei)孔表(biao)(biao)面結構，材(cai)料的(de)表(biao)(biao)面積(ji)不(bu)同。
２．２ 蛋白吸附
浸(jin)泡７ｄ后，不(bu)同材(cai)料(liao)吸附牛(niu)血清(qing)蛋(dan)白（ＢＳＡ）的(de) 能力各不(bu)相同（圖(tu)３（ａ））。ＨＡ－Ｓ吸附（６４±８）μｇ ＢＳＡ （占(zhan)總ＢＳＡ的(de)（１１±１）％），ＨＡ－Ｒ吸附（４８５±５）μｇ ＢＳＡ（占(zhan)總ＢＳＡ的(de)（８１±１）％），ＴｉＯ２ 吸附（１８２±１２）μｇ ＢＳＡ （占(zhan)總ＢＳＡ 的(de)（３０±２）％），氧化鋁(lv) 吸附（２１７±１６）μｇ ＢＳＡ（占(zhan)總ＢＳＡ的(de)（３６±３）％）。
浸泡7ｄ后，不(bu)同材(cai)料吸附(fu)(fu)溶(rong)菌酶素（ｌｙｓｏｚｙｍｅ） 的能力(li)各不(bu)相(xiang)同（圖３（ｂ））。氧化鋁 能吸附(fu)(fu)溶(rong)菌酶素 較(jiao)多，ＨＡ±Ｓ吸附(fu)(fu)較(jiao)少。ＨＡ±Ｓ吸附(fu)(fu)（１±１）μｇ（占(zhan)(zhan)總 量（２±２）％），ＨＡ±Ｒ 吸附(fu)(fu)（６±１）μｇ（占(zhan)(zhan)總量（１０± ２）％）。ＴｉＯ２ 吸附(fu)(fu)（２０±１）μｇ（占(zhan)(zhan)總量（３３±１）％）。
氧化鋁 吸(xi)附(fu)(fu)（５１±１）μｇ（占(zhan)總(zong)量（８５±１）％）。 浸泡７ｄ后，不同材料吸(xi)附(fu)(fu)ＦＢＳ的(de)能力(li)也(ye)不一(yi)樣 （圖３（ｃ））。ＨＡ－Ｓ吸(xi)附(fu)(fu)較(jiao)少（占(zhan)總(zong)量的(de)６％），ＨＡ－Ｒ吸(xi) 附(fu)(fu)較(jiao)多（占(zhan)總(zong)量的(de)３４％），ＴｉＯ２ 和氧化鋁 吸(xi)附(fu)(fu)的(de)量大 致一(yi)致（分別占(zhan)總(zong)量的(de)１２％和１２％）。
陶瓷(ci)材(cai)料化學成分不一樣，蛋白(bai)質(zhi)吸(xi)附能力(li)不同。 微孔(kong)的ＨＡ－Ｒ總比(bi)無微孔(kong)的ＨＡ－Ｓ吸(xi)附更多的蛋白(bai) 質(zhi)，說明對于同一材(cai)料，蛋白(bai)質(zhi)吸(xi)附與材(cai)料微孔(kong)和表面(mian) 積有關(guan)。
２．３ ｒｈＢＭＰ－２吸附
ＨＡ對ｒｈＢＭＰ－２有很強的(de)吸(xi)附能力，與(yu)微孔和(he)(he)表 面積有關，而ＴｉＯ２ 和(he)(he)氧化鋁 陶瓷對ｒｈＢＭＰ－２的(de)吸(xi)附 能力很弱（圖(tu)４所示）。
浸(jin)泡２４ｈ后(hou)，ＨＡ－Ｓ吸(xi)收(shou)（２１．４±４．６）ｎｇ ｒｈＢＭＰ－２ （占(zhan)總量(liang)(liang)的(de)（１．４０±０．３３）％），ＨＡ－Ｒ 吸(xi)收(shou)（４２．９±５．３）ｎｇ ｒｈＢＭＰ－２（占(zhan)總量(liang)(liang)的(de)（２．８７±０．３３）％），ＴｉＯ２ 吸(xi)收(shou) （２．２±０．８）ｎｇ ｒｈＢＭＰ－２（占(zhan)總量(liang)(liang)的(de)（０．１３±０．０６）％）， 氧化鋁 吸(xi)附（０．４±０．２）ｎｇ ｒｈＢＭＰ－２（占(zhan)總量(liang)(liang)的(de)（０．０２± ０．０１）％）。這個結(jie)果驗證了鈣(gai)磷陶(tao)瓷對ＢＭＰ有較強(qiang) 的(de)親(qin)和力，但結(jie)果也(ye)同時顯示ＴｉＯ２ 和氧化鋁 陶(tao)瓷對 ｒｈＢＭＰ－２的(de)吸(xi)附能力很弱。
２．４ 陶瓷材料的成(cheng)骨能(neng)力
肌肉種植(zhi)１２周(zhou)后，所(suo)有ＨＡ－Ｒ，ＴｉＯ２，氧化(hua)(hua)鋁 植(zhi)入 體都有骨(gu)組織(zhi)生成，但在ＨＡ－Ｓ中(zhong)沒(mei)有骨(gu)生成（表１）。 在ＨＡ－Ｓ里只(zhi)發現(xian)纖維(wei)組織(zhi)和血(xue)管(guan)（圖５（ａ），（ｅ））。除 了纖維(wei)組織(zhi)和血(xue)管(guan)外，在ＨＡ－Ｒ的(de)大孔(kong)表面還發現(xian)有 礦(kuang)化(hua)(hua)的(de)骨(gu)組織(zhi)（圖５（ｂ），（ｆ））。與ＨＡ－Ｒ 類似，ＴｉＯ２ （圖５（ｃ），（ｇ））和氧化(hua)(hua)鋁（圖５（ｄ），（ｈ））大孔(kong)中(zhong)有纖維(wei) 組織(zhi)，血(xue)管(guan)和新生骨(gu)組織(zhi)。
組織形態定量(liang)(liang)分(fen)析總結在圖６和表(biao)１，陶瓷種植 體具有不(bu)同(tong)材料(liao)(liao)百分(fen)比(bi)。ＨＡ－Ｓ中(zhong)材料(liao)(liao)占(zhan)（５０．７± ２．８）％，ＨＡ－Ｒ中(zhong)材料(liao)(liao)占(zhan)（５２．４±５．１）％，ＴｉＯ２ 中(zhong)材料(liao)(liao) 占(zhan)（６３．５±１３．３）％，氧(yang)化鋁(lv) 中(zhong)材料(liao)(liao)占(zhan)（６３．５±１０．２）％。 樣品中(zhong)的(de)成(cheng)(cheng)骨(gu)(gu)量(liang)(liang)也有差異。ＨＡ－Ｒ中(zhong)成(cheng)(cheng)骨(gu)(gu)量(liang)(liang)為（７．６± ３．０）％，ＴｉＯ２ 中(zhong)成(cheng)(cheng)骨(gu)(gu)量(liang)(liang)為（１．９±１．０）％，氧(yang)化鋁(lv) 中(zhong)成(cheng)(cheng)骨(gu)(gu)量(liang)(liang) 為（１２．１±５．６）％。由(you)于制(zhi)備陶瓷的(de)材料(liao)(liao)百分(fen)比(bi)不(bu)同(tong) （表(biao)１），陶瓷有不(bu)同(tong)的(de)孔隙率(lv)，因(yin)而無法排除大(da)孔孔隙 率(lv)對(dui)成(cheng)(cheng)骨(gu)(gu)量(liang)(liang)的(de)可能(neng)(neng)影(ying)響。但(dan)單從(cong)新(xin)骨(gu)(gu)發(fa)生(sheng)率(lv)的(de)不(bu)同(tong)， 可以討論材料(liao)(liao)因(yin)素在生(sheng)物材料(liao)(liao)骨(gu)(gu)誘(you)導中(zhong)的(de)可能(neng)(neng)功(gong)能(neng)(neng)。
ＨＡ－Ｒ能(neng)夠(gou)吸附更多(duo)的(de)ｒｈＢＭＰ－２，ＴｉＯ２ 和(he)氧(yang)化(hua)(hua)(hua)鋁 陶瓷幾乎不(bu)吸附ｒｈＢＭＰ－２（圖(tu)４），而(er)它們都能(neng)誘(you)導骨(gu)(gu)(gu)(gu)生(sheng)(sheng)成(cheng)（表１，圖(tu)５和(he)６）。不(bu)同化(hua)(hua)(hua)學組分(fen)的(de)陶瓷材料蛋白(bai) 質吸附（圖(tu)３和(he)４）和(he)成(cheng)骨(gu)(gu)(gu)(gu)能(neng)力的(de)比較不(bu)能(neng)明確蛋白(bai)質吸附在生(sheng)(sheng)物材料骨(gu)(gu)(gu)(gu)誘(you)導中(zhong)的(de)關鍵作用(yong)。 由于鈣(gai)磷(lin)離(li)子(zi)(zi)分(fen)別對(dui)多(duo)潛能(neng)干細(xi)胞的(de)骨(gu)(gu)(gu)(gu)相分(fen)化(hua)(hua)(hua)有 促進作用(yong)，鈣(gai)磷(lin)離(li)子(zi)(zi)釋(shi)放(fang)也通常(chang)作為解釋(shi)磷(lin)酸鈣(gai)陶瓷 誘(you)導成(cheng)骨(gu)(gu)(gu)(gu)的(de)原因之一［４］。本文中(zhong)，骨(gu)(gu)(gu)(gu)組織再生(sheng)(sheng)除了發 生(sheng)(sheng)在微孔(kong)結構的(de)ＨＡ－Ｒ 里(li)，也發生(sheng)(sheng)微孔(kong)ＴｉＯ２ 和(he) 氧(yang)化(hua)(hua)(hua)鋁 陶瓷里(li)。因為ＴｉＯ２ 和(he)氧(yang)化(hua)(hua)(hua)鋁 陶瓷根本無法(fa)釋(shi) 放(fang)出鈣(gai)磷(lin)離(li)子(zi)(zi)，所以這(zhe)個結果否定了鈣(gai)磷(lin)離(li)子(zi)(zi)在骨(gu)(gu)(gu)(gu)誘(you) 導中(zhong)的(de)關鍵作用(yong)。
由于鈣磷離子釋放和重新表面沉積，材料表面形 成類骨磷灰石層，從而使磷酸鈣陶瓷具有生物活性。在類骨磷灰石層形成過程中，體液中的生長因 子參與生物礦化，從而引起生物反應，這也被用來解釋 磷酸鈣陶瓷骨誘導現象。單純的ＴｉＯ２ 和氧化鋁陶瓷是典型的(de)(de)(de)生(sheng)物(wu)惰性(xing)材(cai)料(liao)(liao)，不會在模擬(ni)體液中形成表面(mian)類骨(gu)(gu)磷(lin)灰石(shi)層(ceng)。所以，ＴｉＯ２和(he)氧化鋁陶瓷誘導(dao)成骨(gu)(gu) 的(de)(de)(de)結(jie)果否定了(le)生(sheng)物(wu)礦化在生(sheng)物(wu)材(cai)料(liao)(liao)誘導(dao)成骨(gu)(gu)中的(de)(de)(de)關鍵 作用。 近年來，生(sheng)物(wu)材(cai)料(liao)(liao)的(de)(de)(de)表面(mian)物(wu)理特性(xing)的(de)(de)(de)生(sheng)物(wu)效應(ying)研 究取得進展。多潛能(neng)干細(xi)(xi)胞可(ke)能(neng)根據材(cai)料(liao)(liao)表面(mian)微 孔結(jie)構而(er)改(gai)變它們的(de)(de)(de)形態，而(er)這種細(xi)(xi)胞形態改(gai)變引起 細(xi)(xi)胞的(de)(de)(de)骨(gu)(gu)相分化。特異(yi)的(de)(de)(de)生(sheng)物(wu)材(cai)料(liao)(liao)表面(mian)微孔可(ke)能(neng)直(zhi)接誘導(dao)骨(gu)(gu)組織生(sheng)成。
３ 結 論
（１） ＳＥＭ 和ＢＥＴ的(de)測試結果發現，以雙氧水為 發泡劑，高溫燒(shao)結而成的(de)４種陶瓷具有不同(tong)的(de)表(biao)(biao)面(mian)結 構和表(biao)(biao)面(mian)積(ji)。
（２） 不(bu)同化(hua)學(xue)組分的(de)陶(tao)瓷材料蛋(dan)白質吸附(fu)和(he)成 骨能力的(de)比較(jiao)不(bu)能明確蛋(dan)白質吸附(fu)在生物材料骨誘導(dao) 中的(de)關鍵作(zuo)用。
（３） ＴｉＯ２ 和氧化鋁陶瓷誘(you)導(dao)成骨的(de)結果表(biao)明微(wei) 孔并不是通過鈣磷(lin)離(li)子釋放和表(biao)面生物礦化而起(qi)作 用，也不一定通過蛋白質(zhi)吸附引起(qi)骨誘(you)導(dao)。